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細(xì)胞藥物毒性試驗

簡要描述:細(xì)胞藥物毒性試驗是達(dá)為科生物的基礎(chǔ)服務(wù)項目之一,由細(xì)胞平臺經(jīng)驗豐富的實驗人員操作完成。

  • 更新時間:2022-12-23
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詳細(xì)介紹

MTT常應(yīng)用于檢測細(xì)胞的增殖能力,其檢測原理為活細(xì)胞線粒體中的琥珀酸脫氫酶能使外源性MTT還原為水不溶性的藍(lán)紫色結(jié)晶甲瓚(Formazan),并沉積在細(xì)胞中,而死細(xì)胞無此功能。二甲基亞砜(DMSO)能溶解細(xì)胞中的甲瓚,用酶標(biāo)儀在490nm波長處測定其吸光度值(OD值),在一定細(xì)胞數(shù)范圍內(nèi),MTT結(jié)晶形成的量與細(xì)胞數(shù)成正比。根據(jù)測得的吸光度值(OD值)來判斷活細(xì)胞數(shù)量,OD值越大,細(xì)胞活性越強(qiáng)(如果是測藥物毒性,則表示藥物毒性越小)。

CCK-8常應(yīng)用于檢測細(xì)胞的增殖能力。CCK-8試劑中含有WST–8:化學(xué)名:2-(2-甲氧基-4-硝基苯基)-3-(4-硝基苯基)-5-(2,4-二磺酸苯)-2H-四唑單鈉鹽,它在電子載體1-甲氧基-5-甲基吩嗪*(1-Methoxy PMS)的作用下被細(xì)胞線粒體中的脫氫酶還原為具有高度水溶性的黃色甲臜產(chǎn)物(Formazan)。生成的甲臜物的數(shù)量與活細(xì)胞的數(shù)量成正比,用酶標(biāo)儀在450nm波長處測定其吸光度值(OD值)來判斷活細(xì)胞數(shù)量,OD值越大,細(xì)胞活性越強(qiáng)(如果是測藥物毒性,則表示藥物毒性越小)。

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