侵襲/遷移實驗

簡要描述：細胞侵襲/遷移實驗將Transwell小室放入培養(yǎng)板中，小室內(nèi)稱上室，培養(yǎng)板內(nèi)稱下室，上下層培養(yǎng)液以聚碳酸酯膜相隔，將研究的細胞種在上室內(nèi)，由于聚碳酸酯膜有通透性，下層培養(yǎng)液中的成分可以影響到上室內(nèi)的細胞，應(yīng)用不同孔徑和經(jīng)過不同處理的聚碳酸酯膜，就可以進行共培養(yǎng)、細胞趨化、細胞遷移、細胞侵襲等多種方面的研究。

更新時間：2023-06-29
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詳細介紹

操作步驟
(1)所有細胞培養(yǎng)試劑和Transwell chamber 放在37°C溫育;
(2)待測細胞培養(yǎng)至對數(shù)生長期，消化細胞，用PBS和無血清培養(yǎng)基先后洗滌一次，用無血清培養(yǎng)基懸浮細胞，計數(shù)，調(diào)整濃度為2X10* /ml;
(3)在下室(即24孔板底部)加入600-800μ 1含10%血清的培養(yǎng)基，上室加入100- 150μ 1細胞懸液，繼續(xù)在孵箱培養(yǎng)24小時;
(4)用鑷子小心取出chamber,吸干上室液體，移到預(yù)先加入約800μ 1甲醇的孔中，室溫固定30分鐘;
(5)取出chamber，吸千上室固定液，移到預(yù)先加入約800μ 1 Giemsa 染液的.孔中，室溫染色15-30分鐘;
(6)輕輕用清水沖洗浸泡數(shù)次，取出chamber, 吸去上室液體，用濕棉棒小心擦去_上室底部膜表面上的細胞;
(7)用小鑷子小心揭下膜，底面朝上晾干，移至載玻片上用中性樹膠封片;
(8)顯微鏡下取9個隨機視野計數(shù)，統(tǒng)計結(jié)果。

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